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回答 1 2024-06-17 20:50

电泳中为什么要使用电泳缓冲液和加样缓冲液

已解决 悬赏分:60 - 解决时间 2024-11-16 06:26
电泳中为什么要使用电泳缓冲液和加样缓冲液希望能解答下
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支持 0 反对 0 举报 2024-06-17 20:50

很好的问题。横向比较对于理解深层次的东西很有好处。

这个问题涉及到核酸与蛋白质性质的差异,还有电泳原理。

蛋白质电泳中加入SDS是为了去除本身电荷与分子形状的影响,核酸就不需要。DNA分子形状一致,都是双螺旋。至于电荷,都是磷酸的电荷,所以电荷数量与分子量成正比,这与SDS结合的蛋白质很相似,就是荷质比是一个常数,通过分子筛效应分离,分子越长,摩擦力越大,就落在后面。所以DNA电泳不用额外加变性剂。

另外,核酸的变性剂与蛋白质也不同。核酸变性剂一般是打开双链,测序或RNA电泳的时候才会加入,一般是甲醛或尿素,而不是SDS。

SDS与蛋白质结合是以其疏水尾插入蛋白质中,结合力是疏水键,是一种次级键,不是化学键,所以不是化学反应,可以看作很强的物理吸附。平均大约2个残基结合一个SDS。

20种氨基酸有3种碱性氨基酸,2种酸性氨基酸,它们可以电离,别的基本不电离。比如谷氨酸和天冬氨酸,侧链带羧基,电离情况与末端羧基近似,在中性条件下带负电。核酸中每一个磷酸都带负电,碱基不带电。

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